Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为:WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1),生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。
本产品可用于细胞增殖测定,细胞毒性的检测,b2b商务商务筛选,以及细胞生长抑制检测等。
使用方法
以96孔板为例,96孔板中每孔接种100μL的细胞悬液,在细胞培养箱预培养24 h。
向每孔加入10μL不同浓度的待测物质。如果仅测定细胞活性,则不需要2~3步骤,直接从第四步操作。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(依据待测b2b商务商务而定)。
向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要产生气泡,轻轻混匀)。
将培养板在培养箱内孵育适当时间(一般0.5~2 h)。
酶标仪测定450 nm处的吸光值。
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